叶祖新生于1984年7月8日浙江衢州，毕业于杭州演艺学院和中北英皇演艺专修学校，是一位中国内地男演员。他最早出现在电视剧《情断上海滩》中，扮演角色孙伟。后来又出演了多部电视作品，像是《李小环与苗翠花》《大管家》及《活佛济公2》等。2011年，叶祖新的代表作——由他主演并饰演十阿哥爱新觉罗·胤誐的穿越剧《步步惊心》上映。此外，他还在《活佛济公3》中有过精彩表演，饰演角色小和尚必清。此后，叶祖新参演了古装历史剧《隋唐英雄3》和《隋唐英雄4》，扮演角色为薛丁山。他还在2013年全国风尚权力榜颁奖盛典获得了年度飞跃新人奖。2015年，叶祖新参加了浙江卫视的明星密室逃脱真人秀节目《星星的密室》，拿到首季冠军。2017年，其参与演出的电影《嫌疑人X的献身》上映，他在片中担任警官罗淼的角色。2020年的大型古装剧《清平乐》中，他饰演内侍张茂则。而在2023年的《战火中的青春》中，他出演角色叶润名。2024年，叶祖新主演的电视剧《微暗之火》将在4月27日播出。